細(xì)胞復(fù)蘇，生物學(xué)的一種術(shù)語(yǔ)，是指將凍存在液氮或者-70℃冰箱中的細(xì)胞解凍之后重新培養(yǎng)，細(xì)胞恢復(fù)生長(zhǎng)的過程。細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來，這樣在需要的時(shí)候再?gòu)?fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。

　　細(xì)胞復(fù)蘇的步驟：

　?、賹⒗鋬龉軓囊旱腥〕?，迅速投入37℃水浴融化，細(xì)胞融化后要盡快(約1min)移出37℃水浴。37℃水浴時(shí)間延長(zhǎng)會(huì)提高細(xì)胞死亡率，復(fù)蘇過程中一般細(xì)胞死亡率在20%～25%之間。

　?、谘杆儆镁凭耷虿潦美鋬龉芡獠繗⒕?，然后放置在冰浴上。

　?、坌⌒拈_啟瓶蓋，把細(xì)胞轉(zhuǎn)入含有4mL培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，然后把培養(yǎng)瓶移至培養(yǎng)箱，26℃～28℃培養(yǎng)1h，讓細(xì)胞貼壁。

　?、芗?xì)胞貼壁后，小心移棄培養(yǎng)基，主要是去掉DMSO(懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞要通過離心沉淀除去DMSO)、死細(xì)胞及其碎片，加5mL新鮮培養(yǎng)基，26℃～28℃培養(yǎng)。

　?、菁?xì)胞培養(yǎng)24h后，更換新鮮培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)直到形成單層，便可以傳代。

　?、拊敿?xì)記錄復(fù)蘇細(xì)胞的名稱、數(shù)量、復(fù)蘇時(shí)間、存放部位等。

　　細(xì)胞復(fù)蘇的注意事項(xiàng)：

　　1、注意無菌操作。

　　2、應(yīng)在1-2min內(nèi)使凍存液融化。如果復(fù)溫速度太慢，則會(huì)造成細(xì)胞損傷。另外，細(xì)胞復(fù)蘇后的操作-好在4℃冰浴中進(jìn)行，以減少冷凍保護(hù)劑對(duì)細(xì)胞的毒性。

　　3、細(xì)胞復(fù)蘇過程中，升溫的速率要大，把從液氮或-70℃冰箱中取出的細(xì)胞在短的時(shí)間內(nèi)放入水浴鍋。

　　4、細(xì)胞放入水浴中注意用鑷子夾住細(xì)胞凍存管并在水浴中不時(shí)晃動(dòng)，使其受熱均勻，并防止水浴時(shí)水進(jìn)入細(xì)胞凍存管污染細(xì)胞。打開細(xì)胞凍存管之前要用酒精棉球?qū)龃婀芟静⒘栏伞?/div>